测定值代入SCFAs标准曲线方程进行含量计算。黑木结果显示,耳胞灌胃黑木耳胞外多糖后小鼠粪便中丙酸和丁酸含量显著升高,外多微生其中丙酸含量为对照组的糖对态及3.3倍(P<0.01),丁酸是小鼠响对照组的1.4倍(P<0.05)(图4)。
GPR43是一种特异性短链脂肪酸受体,它可以通过介导短链脂肪酸,免疫在调控脂类代谢和免疫反应等生物学过程以及在动物肠道对营养物质的调节的影吸收中发挥重要作用。本试验对小鼠结肠石蜡切片进行GPR43免疫荧光检测,黑木结果显示胞外多糖组小鼠结肠GPR43的耳胞表达明显高于对照组。
细胞免疫因子参与了炎症的发生、维持和消退,糖对态及在机体免疫中起到重要作用。小鼠响为了探索黑木耳胞外多糖对小鼠免疫调节作用的肠道影响,利用ELISA试验分析了小鼠血清中的免疫相关细胞因子水平。结果如图6所示,胞外多糖组小鼠血清中白介素-10(IL-10)的含量显著升高,是对照组的1.3倍(P<0.05),而其对肿瘤坏死因子(TNF-α)和白介素-6(IL-6)的水平没有明显影响(P>0.05)。
黑木耳中的多种生物活性成分对人体健康具有重要调节作用。本研究利用红外光谱和高效液相定性分析了黑木耳胞外多糖的组分;通过小鼠灌胃试验发现黑木耳胞外多糖可以提高小鼠肠道内益生菌拟杆菌属和罗氏菌属水平,增加丙酸和丁酸含量,提升血清免疫因子IL-10水平。肠道微生物不仅参与人体能量代谢,还与众多疾病相关,使其成为当前研究热点。随着研究的深入,人们更能清楚地认识到维持肠道菌群平衡对人体健康的重要性。近年,抗生素滥用逐渐引起人们的重视,其破坏肠道正常微生物组成,导致肠道菌群失调,致使耐药性细菌产生和传播。研究发现,多糖具有改善机体肠道微生态的作用,具有益生元作用,是理想的微生态调节剂。本研究结果表明,黑木耳胞外多糖具有促进小鼠肠道内拟杆菌属和罗氏菌属菌群增殖的功能。拟杆菌属能对宿主饮食、宿主肠黏膜层和其它微生物表面的复合多糖进行转运和分解;罗氏菌属能够产生短链脂肪酸,尤其是丁酸,不仅具有影响结肠代谢、调节免疫和抗炎等作用,还可用作症状病理学(如胆结石形成)生物标志物或恢复有益菌群的益生菌。因此,作为一种微生态调节剂,黑木耳胞外多糖可以在调控肠道菌群结构方面发挥作用,具有取代抗生素治疗的潜在应用价值。
肠道微生物菌群产生的SCFAs作为膳食纤维的发酵产物,参与宿主免疫调节。在淋巴B细胞中,SCFAs增加乙酰辅酶A并调节代谢传感器以增加氧化磷酸化、糖酵解和脂肪酸合成,从而产生能量和物质促进抗体产生。此外,SCFAs可以通过调节相关基因的表达来调控血浆中B细胞的分化。有研究表明,多糖类物质不被消化道的胃酸和酶类消化,进入肠道后为微生物提供营养源,使其迅速增殖并产生大量SCFAs和一些抗菌物质,降低肠道内pH值,抑制肠道内氨和吲哚等有害物质生成,抑制有害菌生长,从而改善肠道微生态。本研究发现黑木耳胞外多糖能提高小鼠肠道内丙酸和丁酸含量,具有调节肠道物质能量代谢的作用。
Kang等研究了枸杞多糖对自发性结肠炎的有益作用及其在IL-10缺失小鼠中的益生作用,发现枸杞多糖可以提高丁酸盐产生菌罗氏菌属的丰度。IL-10是一种抗炎细胞因子,在控制免疫反应中起关键作用。在缺失IL-10的结肠炎和炎性肠病小鼠模型中,巨噬细胞中受损线粒体积累,导致NLRP3炎性小体激活和IL-1β产生,引发炎性反应。本研究显示,黑木耳胞外多糖能够提升小鼠血清中免疫因子IL-10水平,具有抗炎作用。然而,黑木耳胞外多糖对IL-10的调控机制还不清楚,需要进一步研究阐明。
综上所述,黑木耳胞外多糖能够促进小鼠肠道内有益菌增殖,提高菌群代谢产物SCFAs含量,增加机体抗炎因子水平,在调节肠道微生态平衡及免疫反应方面具有重要作用。本研究为黑木耳胞外多糖益生菌微生态制剂和新型健康食品的开发提供了理论基础。
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